Выбор и подготовка животных
Прежде чем начать токсикологический эксперимент, необходимо четко определить задачу исследования, выбрать объект исследования (вид животных), метод введения вещества, установить длительность опыта.
Выбор животных для эксперимента является весьма ответственным моментом. В первую очередь учитывают такие факторы, как видовая чувствительность, возраст и пол животных. Под видовой чувствительностью понимают неодинаковое отношение животных различных видов к одному и тому же яду.
При определении показателей токсикометрии рекомендуется производить опыты не менее чем на двух видах животных, а именно на лабораторных мышах и крысах. Определение среднесмер-тельной дозы следует проводить как на самцах, так и на самках, поскольку у них прослеживается разница в величинах LD50, которая, вероятно, частично может быть обусловлена различиями в метаболизме вещества в печени животных разного пола. Острая токсичность может существенно меняться с возрастом исследуемых животных.
Кроме того, животные перед исследованием не должны использоваться для других экспериментов, а также подвергаться воздействию любых фармакологических препаратов. Число используемых животных должно быть достаточным для статистического анализа и зависит от метода расчета LD50. Обычно для каждой дозы используют группу из 8—10 животных. Масса выбранных животных должна соответствовать массе половозрелых особей, для мышей — 18—20 г, а для крыс —-180—240 г.
Исходный период постановки токсикологического эксперимента можно условно разделить на следующие этапы:
• подбор требующихся по условиям опыта животных;
• наблюдение, карантин и выбраковка больных животных;
• определение исходных значений исследуемых показателей — фона;
• выбраковка животных с резко выделяющимися значениями показателей;
• распределение по группам;
• статистическая проверка отсутствия межгрупповых различий.